線粒體是真核生物進(jìn)行氧化代謝的部位,是糖類、脂肪和氨基酸終氧化釋放能量的場(chǎng)所。線粒體負(fù)責(zé)的終氧化的共同途徑是三羧酸循環(huán)與氧化磷酸化,分別對(duì)應(yīng)有氧呼吸的第二、三階段。細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中完成的糖酵解和在線粒體基質(zhì)中完成的三羧酸循環(huán)在會(huì)產(chǎn)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinarnideadeninedinucleotide,NADH)和還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(reducedflavinadenosinedinucleotide,F(xiàn)ADH2)等高能分子。
線粒體呼吸儀即為傳統(tǒng)意義上的液相氧電極,氧電極是為測(cè)定水中微量溶解氧含量而設(shè)計(jì)的一種極譜電極,除了測(cè)定線粒體呼吸還具有更為廣泛的用途。它具有靈敏度高、反應(yīng)快、可以連續(xù)測(cè)量、記錄,能夠追蹤反應(yīng)的動(dòng)態(tài)變化過程等優(yōu)點(diǎn),因而在葉綠體及線粒體懸浮液的光合放氧和呼吸耗氧的研究上,在對(duì)某些耗氧或放氧的酶促反應(yīng)的研究上,都得到了廣泛的應(yīng)用。人們利用這種技術(shù)測(cè)定溶液中葉碎塊或游離葉細(xì)胞的光合放氧和呼吸速率,進(jìn)一步改進(jìn)反應(yīng)室,方便的測(cè)定氣體中氧氣的變化動(dòng)態(tài),現(xiàn)已發(fā)展成為一種簡便快速的測(cè)定氧氣變化的常規(guī)技術(shù)。
線粒體呼吸儀廣泛應(yīng)用于植物生理學(xué)、農(nóng)學(xué)、園藝學(xué)、林學(xué)、微生物學(xué)、藻類生物學(xué)、生命科學(xué)、海洋生物學(xué)、動(dòng)物學(xué),人體醫(yī)學(xué)以及環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。
1、測(cè)定動(dòng)物、植物組織細(xì)胞、微生物的呼吸速率和呼吸途徑的變化,分析抗氰呼吸途徑、細(xì)胞色素氧化酶途徑、糖酵解途徑、三羧酸途徑的變化。
2、測(cè)定動(dòng)物、植物等線粒體的呼吸及I態(tài)、II態(tài)、III態(tài)、IV態(tài)呼吸,研究呼吸控制率及P/O比。
3、測(cè)定有氧參與的酶促反應(yīng)過程。如多酚氧化酶、脂氧合酶、H2O2酶等活性。
4、測(cè)定化學(xué)合成放氧物質(zhì)的放氧速率。